熱門品牌
客戶服務(wù)熱線
010-83659275
新產(chǎn)品
-
美谷分子MD ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)
- ImageXpress Confocal HT ai 智能化共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)采用了具有 8 個成像通道的 ...
-
LAUDA導(dǎo)熱液體：滿足您恒溫器的安全和可靠的運行
- LAUDA導(dǎo)熱液體：滿足您恒溫器的安全和可靠的運行。極端溫度下高精度的溫度控制，可靠和長時間穩(wěn)...
-
- LAUDA浸入式冷卻器ETK 30和ETK50緊湊的浸入式冷卻器配備有高質(zhì)量不銹鋼制成的冷卻盤管。和加熱...
-
- LAUDA穿流式冷卻器風(fēng)冷卻、全封閉并且免維護的冷卻單元，擁有很緊湊的換熱器，并且使用聚酯保溫...
-
LAUDA Proline校驗恒溫器：溫控范圍-40到300C
- LAUDA Proline校驗恒溫器：提供溫度范圍從-40到300C的校準(zhǔn)和調(diào)整。LAUDA Proline高溫度到300C...
-
LAUDA Ecoline校驗專用恒溫器：應(yīng)用于校準(zhǔn)和調(diào)節(jié)溫度
- LAUDA Ecoline校驗專用浴槽Ecoline Staredition可以提供低溫在-30℃時的溫度穩(wěn)定性達(dá)到±0 01...
-
LAUDA UItracool工藝過程冷卻水循環(huán)器：-5到25℃
- LAUDA UItracool工藝過程冷卻水循環(huán)器：提供高達(dá)265kW的制冷功率，溫度范圍從-5到25℃滿足工業(yè)...
-
LAUDA Varnocool冷卻水循環(huán)器：控溫范圍-20到40℃
- LAUDA Variocool功率高到10kW，溫度從-20到40℃，用來帶走實驗室設(shè)備、小型工廠和生產(chǎn)區(qū)產(chǎn)生的...
推薦文章
- 86高壓滅菌鍋如何使用？高壓滅菌器的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟
- 86AGI是哪個國家的？日本AGI品牌介紹
- 86反應(yīng)釜加熱制冷不均勻？AGI環(huán)形導(dǎo)流板技術(shù)均勻
- 86Sonics超聲波破碎儀使用注意事項和應(yīng)用領(lǐng)域
- 86Sonic Concepts高頻超聲換能器專家
- 86AGI反應(yīng)釜RingBaffle技術(shù) 溫度控制技術(shù)
- 86RedEdge-MX機載五通道型多光譜成像儀(WiFi時代)
- 86超聲波清洗器和超聲波細(xì)胞破碎儀的區(qū)別及應(yīng)用
- 86美國FluxData SPECTRANOVA FD-D8-M3測色儀支持在線和工業(yè)
- 86ROYAL NEST孵蛋器為疫苗研發(fā)提供助力
聯(lián)系我們
北京德泉興業(yè)商貿(mào)有限公司
地址：北京市豐臺區(qū)西四環(huán)南路46號國潤商務(wù)大廈2605室
郵編：100073
地址：北京市豐臺區(qū)西四環(huán)南路46號國潤商務(wù)大廈2605室
郵編：100073
電話：010－83659275
傳真：010－83659476,83659576-20
劫持抗體誘導(dǎo)的 CTLA-4 溶酶體降解，用于更安全和更有效的癌癥免疫治療
日期：2022-10-28 16:36:19???
點擊：
癌癥免疫療法是一類通過激活免疫系統(tǒng)來治療癌癥的方法，其中，免疫檢查點抑制劑是近些年研究最多的方法之一，隨著 2011 年首個免疫檢查點抑制劑 Ipilimumab 上市，免疫檢查點抑制劑的市場份額迅速增長，已然成為腫瘤治療最吸金的領(lǐng)域之一。所謂免疫檢查點指的是細(xì)胞會產(chǎn)生抑制自身的蛋白小分子，腫瘤細(xì)胞利用這種機制，抑制免疫細(xì)胞，從人體免疫系統(tǒng)中逃脫存活下來，也就是腫瘤逃避免疫系統(tǒng)對其攻擊的關(guān)鍵點，而免疫檢查點抑制劑則是一類可解除這種抑制作用，讓免疫細(xì)胞重新激活工作消滅癌細(xì)胞的藥物。
CTLA-4 是最早發(fā)現(xiàn)的一個免疫檢查點，順便一提的是美國科學(xué)家詹姆斯·艾利森（James P. Allision）因發(fā)現(xiàn)并研究了 CTLA-4 而獲得了 2018 年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎。然而，這樣一個已經(jīng)發(fā)現(xiàn)較多年的明星般的免疫檢查點，其抑制劑（anti-CTLA-4 抗體）在臨床上的使用卻會造成嚴(yán)重的免疫治療相關(guān)不良反應(yīng)（irAEs）且癌癥免疫治療效果（CITE）也不夠理想，原因則并不清楚。來自美國馬里蘭大學(xué)巴爾的摩醫(yī)學(xué)院免疫治療分部（Divisions of Immunotherapy， University of Maryland Baltimore School of Medicine，Baltimore）的科學(xué)家們?yōu)槲覀?/span>揭示了 anti-CTLA-4 抗體導(dǎo)致的細(xì)胞表面 CTLA-4 經(jīng)歷溶酶體降解過程是不良反應(yīng)和低療效的關(guān)鍵原因，并且闡述了 HL12 和 HL32 兩種抗體能在胞吞作用后很快與 CTLA-4 解離，使 CTLA-4 再循環(huán)至細(xì)胞表面，避免了溶酶體降解的命運，從而降低了不良反應(yīng)并提高了療效，為基于 anti-CTLA-4 抗體的癌癥免疫治療提供了新的視野和思路。這一研究成果發(fā)表在了《Cell Research》雜志上。
研究人員首先通過 WB 和流式細(xì)胞術(shù)在體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)小鼠實驗中均證明了我們前面提到的首個免疫檢查點抑制劑 Ipilimumab 會顯著降低調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Tregs）表面的 CTLA-4 的水平，包括 anti-PD-1 抗體/ Ipilimumab 聯(lián)合治療的方式。緊接著，利用和 Ipilimumab 具有同樣特點的 Tremelimumab （TremeIgG1），通過和無不良反應(yīng)的兩種抗體 HL12 和 HL32 進行比較，發(fā)現(xiàn)無論體外還是體內(nèi)，單獨處理或是和 anti-PD-1 抗體聯(lián)合處理，HL12 和 HL32 都不會引起 CTLA-4 水平下降，表明 Ipilimumab 和 TremeIgG1 所導(dǎo)致的細(xì)胞表面 CTLA-4 水平下調(diào)與不良反應(yīng)有關(guān)。
圖 1 Ipilimumab 下調(diào)細(xì)胞 CTLA-4
圖 2 anti-CTLA-4 單抗下調(diào) CTLA-4 與其不良反應(yīng)相關(guān)
隨后，研究人員探索了 CTLA-4 降低的機制，分別使用蛋白酶體抑制劑 MG132 和溶酶體抑制劑 Chloroquine（CQ）對加入了 Ipilimumab 的細(xì)胞進行處理，發(fā)現(xiàn) CQ 挽救了 CTLA-4 的下降，再通過對 anti-CTLA-4 單抗、CTLA-4 和溶酶體進行熒光標(biāo)記成像，分析它們的共定位情況，發(fā)現(xiàn) Ipilimumab 和 TremeIgG1 與 CTLA-4 和溶酶體是共定位的，而 HL12 和 HL32 則不會，證明了 Ipilimumab 和 TremeIgG1 這兩種導(dǎo)致不良反應(yīng)的抗體可以促進 CTLA-4 的溶酶體降解（圖 3 a-c）。研究人員又借助免疫共沉淀（IP）的方法驗證了上述發(fā)現(xiàn)，使結(jié)果更加嚴(yán)謹(jǐn)（圖 3 d）。為了研究 pH 對抗體結(jié)合 CTLA-4 的影響，研究人員將不同種類的抗體加入到使用包被有 hCTLA-4 的 ELISA 孔板中，在具有三功能檢測模式的 SpectraMax iD3 （Molecular Devices）微孔板讀板機上檢測不同 pH 值下的 OD450 ，結(jié)果表明 HL12 和 HL32 在低于 pH6.5 時其與 hCTLA-4 的結(jié)合能力即開始下降，而這正是早期內(nèi)涵體的 pH 值，pH 越低，下降越快，反觀 Ipilimumab 和 TremeIgG1 在 pH 4 到 pH 7 范圍內(nèi)其結(jié)合能力幾乎沒有明顯變化（圖 3 f）。以上發(fā)現(xiàn)表明 pH 不敏感的 anti-CTLA-4 單抗可觸發(fā) CTLA-4 的溶酶體降解過程。
圖 3 pH 不敏感的 anti-CTLA-4 單抗
可觸發(fā) CTLA-4 的溶酶體降解
接下來的一個重要結(jié)果是提高 anti-CTLA-4 抗體的 pH 敏感度能夠減弱不良反應(yīng)。研究人員將 TremeIgG1 的互補決定區(qū)（complementarity-determining regions，CDRs）的酪氨酸替換為組氨酸，以增加其 pH 敏感度，由此產(chǎn)生了 TremeIgG1 的 6 種變體，將它們命名為 Ab154-159 。根據(jù)前面提到的 ELISA 實驗評估這些變體和 TremeIgG1 與 CTLA-4 在不同 pH 下的結(jié)合能力，其中 Ab156 和 Ab157 在低 pH 下甚至比 HL12 對 pH 更加敏感（圖 4 a）。而免疫共沉淀、WB 以及流式細(xì)胞術(shù)等實驗共同證明了 Ab156 和 Ab157 處理的細(xì)胞的 CTLA-4 水平?jīng)]有下降（圖 4 b-d），分析熒光標(biāo)記成像的共定位情況更直接的展示了 Ab157 與 TremeIgG1 截然相反的現(xiàn)象，即 Ab157 與溶酶體無共定位（圖 4 e）。即使和 anti-PD-1 抗體聯(lián)合處理，Ab157 也很好的維持了 CTLA-4 的水平（圖 4 f）。將 anti-PD-1 抗體分別和 Ab157、TremeIgG1 共同注射進小鼠體內(nèi)，測量小鼠體重變化，發(fā)現(xiàn) anti-PD-1/TremeIgG1 導(dǎo)致體重的大幅減少，而 anti-PD-1/ Ab157 則對體重的影響很小；和體重結(jié)果相應(yīng)的是，在小鼠存活率方面，anti-PD-1 / TremeIgG1 的死亡率高達(dá) 90，而 anti-PD-1 / Ab157 的死亡率則很低（圖 4 g-h），說明增加抗體的 pH 敏感度減弱了不良反應(yīng)并增加了藥物安全性。
圖 4 pH 敏感性增強的工程抗體變體可減弱不良反應(yīng)
anti-CTLA-4 抗體通過抗體依賴的細(xì)胞毒作用（antibody-dependent cellular cytotoxicity，ADCC）清除腫瘤微環(huán)境中的調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Tregs），以實現(xiàn)癌癥免疫治療效果（CITE）。研究人員使用具有高靈敏度發(fā)光檢測功能的 SpectraMax iD3（Molecular Devices）微孔板讀板機檢測 ADCC 發(fā)光信號強度，發(fā)現(xiàn) Ipilimumab 的 ADCC 活性很弱，而 HL12 和 HL32 則表現(xiàn)出相當(dāng)高的 ADCC 活性，并用 CTLA-4 缺陷型細(xì)胞（無法再循環(huán)到細(xì)胞表面）進行了同樣的實驗，此時幾種抗體的 ADCC 活性均未表現(xiàn)出明顯的差異（圖 5 d）；TremeIgG1 和 Ab157 的 ADCC 活性也進行了檢測，結(jié)果表明后者的活性明顯高于前者（圖 5 h）。
最后，研究人員測量了這些抗體給藥之后的腫瘤大小和體積，不出所料，HL12 和 HL32 以及 Ab157 對腫瘤的抑制作用均明顯高于 Ipilimumab 和 TremeIgG1，以上結(jié)果說明 pH 敏感性提高了 anti-CTLA-4 抗體的治療效果。
圖 5 pH 敏感性提高了 anti-CTLA-4 抗體的治療效果
邀請函日程
13：00 – 13：05
實驗室市場部經(jīng)理 宋卓
MCU紫外學(xué)院項目介紹
13：05 – 13：10
實驗室市場部經(jīng)理 宋卓
實驗室紫外業(yè)務(wù)經(jīng)理 曹建
MCU紫外學(xué)院揭牌儀式
13：10 – 13：15
實驗室紫外業(yè)務(wù)經(jīng)理 曹建
EasyPlus新品上市致辭
13：15 – 13：40
實驗室紫外業(yè)務(wù)產(chǎn)品經(jīng)理 高昇
EasyPlus新品上市
13：40 – 14：10
實驗室紫外應(yīng)用工程師 雷杰
EasyPlus應(yīng)用介紹
14：10 – 14：25
實驗室應(yīng)用工程師 雷杰&喬斌
梅特勒托利多實驗室云游
14:30
神秘大獎抽取
先來劇透一段視頻，一睹新品的風(fēng)采吧！
相關(guān)文章推薦